【生物化學應用】Block量子級聯激光快速紅外成像系統(tǒng)
為了從生物或化學樣品中獲得高質量的分子結構,一般在光學顯微鏡下采用造影劑染料涂敷樣品以提高對比度,但是造影劑可能破壞樣品,并且受限于已知成像的分子結構。隨著光譜成像技術的發(fā)展,使用紅外吸收技術,能夠對微米厚度的樣品進行無干擾的分子研究。分子在特定光譜范圍內有特征峰,使得紅外光譜成像系統(tǒng)在不需要染料涂敷樣品的情況下解析分子結構,準確識別樣品的化學成分。基于寬范圍可調諧量子級聯激光器(QCL)和碲化汞鎘(MCT)探測器搭建離散頻率紅外(DFIR)光譜成像系統(tǒng),可以實時記錄光譜數據。
圖1 Block QCL激光器和MCT探測器
客戶將圖1的Block LaserTune QCL激光器和MCT探測器組合使用。激光器內部搭載4個寬范圍調諧的QCL模塊合束光路,光譜范圍覆蓋MCT探測器和DFIR顯微鏡的探測區(qū)域(776.9-1904.4 cm-1)。
圖2 離散頻率紅外(DFIR)光譜成像系統(tǒng)
圖2(A)中的可調諧QCL激光器來自Block Engineering公司的LaserTune 4000,它包含4個獨立的QCL芯片,可調范圍為776.9至1904.4 cm-1,平均光功率在0.5至10 mW之間。
基于QCL激光器和MCT探測器搭建的離散頻率紅外(DFIR)光譜成像系統(tǒng),使得顯微鏡能夠實現寬光譜覆蓋、寬視場檢測和衍射光譜成像。圖2(B)是各儀器接線圖,顯示系統(tǒng)的主要控制組件。圖2(C)是通訊協議,從QCL輸出的激光實時在外部示波器檢測,該示波器根據的頻譜分辨率和掃描速度觸發(fā)MCT探測器和顯微鏡。
客戶將QCL激光器設置為31 ns的脈沖,2 MHz的脈沖寬度,6.2%的占空比。掃頻時激光間隔輸出TTL同步脈沖,使用150 mm F1和反射鏡(F2)將A1光束聚焦到汞碲化鎘(MCT)探測器中,MCT探測器具備微秒級的掃描速度響應。圖3中QCL芯片之間的交叉頻率產生的頻譜噪聲,經過采集后的降噪處理,得到高質量的單光束光譜(藍色)。
圖3 離散頻率紅外(DFIR)光譜成像系統(tǒng)快速掃頻(藍色),傅里葉變換紅外(FT-IR)成像光譜儀系統(tǒng)快速掃頻(紅色)
圖4 樣品中“BLOCK”的每個字母都用不同的化學物質寫在玻璃基板上
圖5 以咖啡yin(Caffeine)樣品的反射率
圖5中藍色線為離散頻率紅外(DFIR)光譜成像系統(tǒng)的測量光譜,黑色線為傅里葉變換紅外(FT-IR)成像光譜儀系統(tǒng)的參考光譜。通過咖啡yin的測量光譜和參考光譜的比較,客戶證明了該系統(tǒng)的光譜和空間保真度至少與傅里葉變換紅外(FT-IR)成像光譜儀系統(tǒng)一樣好。同時與10倍像素的高性能線性陣列系統(tǒng)的*光譜質量相比,DFIR優(yōu)化了等效光譜信噪比(SNR),在光譜頻率上以更快的時間掃描更多的組織微陣列(TMA)。這些進展為高通量紅外生物化學成像,特別是細胞、組織和化學污染物的檢測提供了新的機會。